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酶標(biāo)分析儀的原理及分類

點(diǎn)擊次數(shù):579 更新時(shí)間:2022-08-17

酶標(biāo)分析儀的原理及分類

原理

  酶標(biāo)分析儀本質(zhì)為一臺(tái)變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì),基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔板中的待測(cè)標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測(cè)器上,光電檢測(cè)器將這些光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號(hào),電信號(hào)經(jīng)前置放大、對(duì)數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動(dòng)來移動(dòng)微孔板,從而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)過程。有些酶標(biāo)分析儀采用手工移動(dòng)微孔板進(jìn)行檢測(cè),省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單 。

  分類

  按照功能不同酶標(biāo)分析儀可以分為光吸收酶標(biāo)儀,熒光酶標(biāo)儀,化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀和多功能的酶標(biāo)儀 。

  1.光吸收酶標(biāo)儀

  光吸收酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行可見光與紫外光吸光度的檢測(cè)。特定波長的光通過微孔板中的樣品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關(guān)系,由此可以用來定性和定量的檢測(cè)。光吸收的檢測(cè)技術(shù)成熟,成本低,操作簡單,但是動(dòng)態(tài)范圍窄,靈敏度比較低,特異性不強(qiáng)。一般可見光和紫外光分別采用鎢燈及氘燈作為光源,而紫外/可見酶標(biāo)儀是可以將兩種光源進(jìn)行切換,適應(yīng)不同測(cè)量波長的需求。

  2. 熒光酶標(biāo)儀

  熒光酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行熒光的檢測(cè)。通過激發(fā)光柵分光后的特定波長的光照射到被熒光物質(zhì)標(biāo)定的樣品上后,會(huì)發(fā)出波長更長的發(fā)射光,通過發(fā)射光柵后到達(dá)檢測(cè)器。熒光的強(qiáng)度與樣品的濃度呈一定的比例。熒光檢測(cè)靈敏度高,可實(shí)時(shí)檢測(cè),使用方便,檢測(cè)模式多樣,但是容易受外界干擾,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響,干擾檢測(cè)。

  3. 化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀

  化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀是來自生物化學(xué)反應(yīng)中的自發(fā)光,可分為輝光型和閃光型兩種類型。輝光型發(fā)光持久,穩(wěn)定,能持續(xù)一段時(shí)間;閃光型發(fā)光時(shí)間短,變化快,穩(wěn)定性不強(qiáng),需要應(yīng)用自動(dòng)加樣器才可以進(jìn)行?;瘜W(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀靈敏度非常高,動(dòng)力學(xué)范圍廣。

  4. 多功能酶標(biāo)儀

  多功能酶標(biāo)儀是以上三種酶標(biāo)儀的集合,集成了兩種或者三種酶標(biāo)儀于一體,可以同時(shí)進(jìn)行光吸收,熒光和化學(xué)發(fā)光的檢測(cè),功能強(qiáng)大,使用范圍廣,可作為研究平臺(tái),避免了重復(fù)購買,是實(shí)驗(yàn)室的shou選。

  按照濾光方式的不同酶標(biāo)儀可分為濾光片式酶標(biāo)儀和光柵式酶標(biāo)儀。

  1.濾光片式酶標(biāo)儀

  濾光片式酶標(biāo)儀采用濾光片來進(jìn)行波長的選擇,光源發(fā)出的全波譜光經(jīng)過濾光片后,大部分被過濾,只剩下濾光片本身允許的波長通過,因此只能截取特定波長進(jìn)行檢測(cè)。

  2. 光柵式酶標(biāo)儀

  光柵式酶標(biāo)儀采用光柵進(jìn)行分光,光源發(fā)出的全波譜光線經(jīng)過光柵后,通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光,就可以獲得任意波長的光,波長連續(xù)可調(diào)。光柵式酶標(biāo)儀使用方便靈活,可選擇任意波長的光,也能進(jìn)行全波長的掃描,通過全波長掃描可以獲得未知樣品的吸收峰,從而可以達(dá)到檢測(cè)未知樣品的目的。


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