電子顯微鏡和數(shù)碼顯微鏡的區(qū)別
電子顯微鏡和數(shù)碼顯微鏡的區(qū)別
“數(shù)碼顯微鏡"實(shí)際上是光學(xué)顯微鏡上加裝的數(shù)碼成像裝置,可以將顯微鏡形成的圖像直接顯示在電腦屏幕上?;A(chǔ)仍然是光學(xué)顯微鏡,而電子顯微鏡的成像原理是根本的區(qū)別。在這里,我們要區(qū)分分辨率和放大倍數(shù)。當(dāng)一個(gè)小物體被放大成像時(shí),它的高分辨率取決于反射光波的波長。波長越短,分辨率越高。電子顯微鏡使用波長比普通可見光短得多的X射線成像,當(dāng)然分辨率很高,而普通“數(shù)碼顯微鏡"的放大倍數(shù)可以很大,但分辨率無法提高。
光學(xué)顯微鏡的分辨率與光波的波長有關(guān)。對于接近和小于光波波長的物體,光學(xué)顯微鏡是無能為力的。電子運(yùn)動(dòng)的波長比光波的波長短得多,可以看到更小的物體。光學(xué)顯微鏡由一組光學(xué)透鏡組成。放大成像系統(tǒng),電子顯微鏡用電子流代替可見光,磁場代替透鏡,電子運(yùn)動(dòng)代替光子,這樣你就可以看到比光學(xué)系統(tǒng)能看到的更小的物體。
電子顯微鏡以電子束為基礎(chǔ)。照明光源是利用電子流向樣品的透射或反射和電磁透鏡的多級放大在熒光屏上成像的大型儀器,而光學(xué)顯微鏡是利用可見光的光學(xué)儀器。光照亮微小的物體,形成放大的圖像。綜上所述,電子顯微鏡和光學(xué)顯微鏡主要有以下區(qū)別:
1、照明光源不同。電子顯微鏡使用的照明源是電子槍發(fā)出的電子流,而光鏡的照明源是可見光(日光或光),由于電子流的波長短得多比光波的波長,所以電子顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率明顯高于光鏡。
2.鏡頭不同。在電子顯微鏡中起放大作用的物鏡是電磁透鏡(在中心可以產(chǎn)生磁場的環(huán)形電磁線圈),而光透鏡的物鏡是由玻璃制成的光學(xué)透鏡。電子顯微鏡中有三組電磁透鏡,相當(dāng)于光鏡中的聚光鏡、物鏡和目鏡的功能。
3、成像原理不同。在電子顯微鏡中,作用是將試樣上的電子束通過電磁透鏡放大,實(shí)現(xiàn)在熒光屏上成像或作用在感光膜上。電子密度差異的機(jī)理是當(dāng)電子束作用于試樣時(shí),入射電子與物質(zhì)的原子發(fā)生碰撞而發(fā)生散射。由于樣品的不同部分對電子的散射程度不同,因此樣品的電子圖像以陰影呈現(xiàn)。和光鏡中的樣品產(chǎn)品實(shí)物圖像呈現(xiàn)亮度差異,這是由于被測樣品的不同結(jié)構(gòu)吸光量不同造成的。
4. 使用不同的試樣制備方法。用于電子顯微鏡觀察的組織細(xì)胞標(biāo)本的制備程序復(fù)雜,技術(shù)難度大,成本高。材料提取、固定、脫水、包埋等環(huán)節(jié)需要特殊的試劑和操作。之后,需要放置嵌入的組織塊。進(jìn)入超薄切片機(jī),切成厚度為50~100nm的超薄標(biāo)本。光鏡觀察的標(biāo)本一般放在載玻片上,如普通組織切片標(biāo)本、細(xì)胞涂片標(biāo)本、組織壓片標(biāo)本和細(xì)胞滴標(biāo)本等。